在美国的威胁言论引发紧张局势之际，巴拿马民众于美国国务卿鲁比奥访问前夕举行大规模反美示威活动，表达对美国总统特朗普意图夺回巴拿马运河控制权的不满。
示威活动中，参与者包括学生和教师，他们通过焚烧特朗普和鲁比奥的肖像来宣泄愤怒。活动中，示威者与防暴警察发生冲突，警方动用催泪弹驱散人群。此前，另一抗议团体也曾焚烧轮胎以示抗议，随后同样被警方强行驱散。一位教师工会领袖桑切斯公开表示，抗议者坚决反对美国将巴拿马重新变为保护国或殖民地的企图，强调将全力捍卫国家主权。
特朗普近期多次声称，巴拿马运河是美国的重大国家资产，指责中国对运河航道拥有不当影响力。他甚至在1月20日的就职演说中表示，中国实际上在“运营”这条于1999年由美国移交给巴拿马的运河，并暗示可能通过军事手段要求巴拿马“归还”运河控制权。
鲁比奥此次访问巴拿马，是他担任国务卿后的首次出访，同时还将前往萨尔瓦多、危地马拉、哥斯达黎加和多米尼加。据分析，此行可能是对特朗普强硬外交政策的一次检验，与以往美国政府试图拉近与拉美国家关系的策略形成对比。前美国驻巴拿马大使约翰·菲利指出，应将美洲视为充满机遇的地区，而非仅仅充满威胁。
巴拿马总统穆利诺对此态度坚定，明确表示不会就运河主权问题与美国展开任何谈判。他在1月30日强调，运河属于巴拿马，这一事实不容置疑，且在与鲁比奥的会面中不会涉及运河控制权的讨论。穆利诺还提到，运河近年来持续扩建，为全球贸易平衡和世界服务作出公平贡献。
当地民众同样对美国的干预表示强烈反对。一位名叫埃斯特拉的巴拿马设计师坚称，运河是巴拿马人的财产，而工会负责人埃德加多则呼吁特朗普尊重巴拿马主权，强调巴拿马人绝不会出卖运河。